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荧光定量PCR检测(Real-time PCR,QPCR)
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荧光定量PCR检测(Real-time PCR,QPCR)
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货号
SDS-10243
规格
/基因/样 (荧光定量PCR检测)
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商品介绍

服务介绍:

荧光定量PCR是通过荧光染料(SYBR Green)或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。可以用于检测mRNA的基因表达水平。


实验流程:

取材-RNA提取逆转录成cDNA-QPCR扩增-数据分析-出报告


送样运输要求:

1样品处理

a)动物组织:常规组织100mg,脂肪组织,结缔组织,纤维化组织适当增加。将组织剪切成合适大小后(建议组织块长宽高均不大于0.5 cm),然后迅速完全浸泡于5~10倍体积的RNAsolidTM试剂中。(注意:已浸入RNAsolidTM试剂中的组织经平衡一段时间后,可从溶液中取出,切成更小的组织块,再重新放回RNAsolidTM试剂中;有些比较弱的液体渗透性组织如骨头等,不适合用RNAsolidTM试剂进行RNA保护。)

b)植物组织:新鲜的叶、果肉、种子最少100 mg。将嫩叶,嫩茎组织切成合适的大小(建议长宽高均不大于0.5 cm)后,然后迅速完全浸泡于5~10倍体积的RNAsolidTM试剂中。(注意:某些植物组织天生具有的屏障,如叶子表面的蜡层可阻碍RNAsolidTM试剂的渗透,对于此类组织,通常需破坏这些屏障层以允许溶液的浸透。)

c)细胞等样本:收集不少于10^6个细胞沉淀(用PBS清洗1-2次),干冰运输。

d)酵母、细菌等样本:离心弃上清,收集一定量的菌体沉淀,干冰运输。

e)全血:最少1 mL新鲜血液EDTA抗凝管,干冰运输。

f)血清或血浆:最少1 mL,干冰运输。

g)RNA样品:OD260/280为1.8-2.0,浓度≥100 ng/μL,体积≥20μL,干冰运输。

h)cDNA:cDNA原液≥20 μL,干冰运输。

 

2样品保存及运输

加入有RNAsolidTM试剂的样本可在37℃保存1~2天,2天以后部分组织中的RNA会开始降解。室温(25℃)稳定保存1周,不会有明显的RNA降解发生。大部分样品置于RNAsolidTM试剂中,4℃条件下可稳定保存1个月,不会有明显的RNA降解发生。长期存放可先将保存在RNAsolidTM试剂中的样本4℃浸透过夜,然后将RNAsolidTM试剂吸出弃去,再将样本放入-20℃或-80℃长期稳定保存3~5年。

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