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服务介绍:
染色质免疫共沉淀(Chromatin Immunoprecipitation),简称CHIP;是目前唯一研究体内DNA与蛋白质相互作用的方法,它不仅可以检测体内反式作用因子与DNA的相互作用,还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰与基因表达关系。
实验流程:
样本处理-超声检测-input检测及反馈-免疫沉淀-洗脱-产物检测-结果分析
送样运输要求:
1、只接受细胞样本,细胞量要求为10^7以上,外地需要按照预处理步骤处理细胞,然后收集细胞沉淀,干冰运输;
2、抗体要求为CHIP级别,-20运输;
3、引物可由客户提供,干粉常温运输,液体-20运输;也可以提供转录因子和启动子以及样本种属信息,我们进行预测并设计合成引物。
外地运输预处理步骤:
1、取出1平皿细胞(10cm平皿),加入190ul 37%甲醛,使甲醛的终浓度为1%(培养基共有7ml);
2、37摄氏度孵育孵育10min;(恒温培养箱,培养箱要提前开启)
3、终止交联:按350ul 2.5M甘氨酸于平皿中,混匀后,在室温下放置5min;
4、去掉培养基,用预冷的PBS清洗细胞2-3次;
5、收集细胞,2000g离心5min,去上清;
6、细胞沉淀,干冰运输。
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