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服务介绍:
样本:主要见于初生根内
保存方法:样本用卡诺固定液(乙醇:冰醋酸)固定,常温运输。夏季高温时需加冰袋。
切片:石蜡切片,根横切。
染色:苯胺蓝+小檗碱,荧光显微镜拍照。推荐切片扫描。
目的:植物维管结构中的凯氏带。
实验流程:
脱蜡至水—凯氏带染色—脱水封片—显微镜镜检
1、依次将切片放入二甲苯Ⅰ 20 min-二甲苯Ⅱ 20 min-无水乙醇Ⅰ 5 min-无水乙醇Ⅱ 5 min-75%酒精5 min,自来水洗。
2、切片入0.1%盐酸小檗碱染色液中避光染色1 h,水洗3-5次,吸干水分,切片于0.05%苯胺蓝染色液中避光染色30 min,水洗3-5次,吸干水分。
3、封片:滴加抗荧光淬灭封片液封片,盖盖玻片。
4、拍照:观察拍照,用荧光显微镜(DAPI滤光片)观察凯氏带,荧光易淬灭,应尽快拍照,注意避光,切片可短暂保存于4℃。
结果预读
在内皮层细胞的上、下壁和径向壁上,凯氏带呈亮蓝色的带状结构环绕细胞一周。
送样运输要求:
1.样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上,常温运输送样。
切勿固定时间过长,切勿冷冻结冰。
2.石蜡切片常温运输,冰冻切片-20℃运输。
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