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服务介绍:
2,3,5-三苯基氯化四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride,TTC),分子量为334.80,分子式为C19H15CIN4,CAS号为298-96-4,TTC是脂溶性光敏感复合物,最初用于检测种子生存能力,后来用于染色检测哺乳动物组织的缺血梗塞。
实验原理:
TTC是呼吸链中吡啶核苷结合酶系统的质子受体,由于各种脱氢酶的活性,白色化合物在活组织中被酶促还原为红色TPF(1,3,5-三苯基甲臜),而在坏死区域,这些酶已经变性或降解,因此在坏死区域保持白色,该染色是一种用于评价组织内脱氢酶活性的大体染色方法。
实验步骤
1、取材:动物麻醉后立即取新鲜组织(如脑、心脏),不经固定液固定,将组织直接放入OCT包埋剂-20℃速冻30min,如果不急用,可以暂时放置-80℃冻存。
2、组织块切片:将冻好的组织稍解冻,用莱卡新刀片手动切片,厚度2-3mm为宜,切面整齐。
3、TTC染色:将切片放入提前37℃预热好的的TTC孵育液中,放入37℃水浴锅中避光孵育 30min,间隔10min轻轻摇动组织,使其均匀接触到染色液,并观察染色结果。
4、拍照:组织成色后,加入固定液终止反应,并避光保存组织,照相机拍照。
送样运输要求:
新鲜组织, -80℃运输
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