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服务介绍:
鬼笔环肽(phalloidin)可特异性与细胞内聚合微丝中的丝状肌动蛋F-actin结合,通过藕联的荧光素分子,从而显示微丝骨架在细胞中的分布。与抗体相比,鬼笔环肽无物种限制,染色特异性极强,染色区和未染色区对比性非常清晰,而且标记后的肌动蛋白许多生理特性都得以维持。也适用于甲醛固定和去垢剂通透处理后的组织或细胞样本。
实验流程:
1.细胞固定并破膜:培养好的细胞爬片倒去培养基,用PBS洗。4%多聚甲醛固定30min,PBS洗3次,每次5min,滴加0.1%TRITON,破膜20min.
2.加鬼笔环肽:爬片稍甩干后用组化笔在盖玻片中间细胞分布均匀的位置画圈(防止液体流走),加50-100μl鬼笔环肽工作液,室温孵育2h,PBS洗3次,每次5 min。
3.DAPI复染细胞核:爬片用PBS(PH7.4)洗涤3次,每次5min。去除PBS后在圈内滴加DAPI染液,避光室温孵育10min
送样运输要求:
按细胞准备流程PFA固定细胞15min后用无菌PBS洗涤后用无菌PBS浸泡,离心管封口膜封好,4℃冰袋保存运输到实验室
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