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服务介绍:
可代替胸腺嘧啶在DNA合成期(S期),渗入正在复制的DNA分子,活体注射或细胞培养加入,而后利用抗Brdu单克隆抗体,ICC染色,显示增殖细胞。同时结合其它细胞标记物,双重染色。
实验流程:
1、加破膜液破膜20min;
2、DAPI染核8min;
3、用4%的多聚甲醛固定10min;
4、用纯水稀释盐酸(盐酸:纯水=1:7),滴加到爬片上37℃孵育40min;
5、用4%的多聚甲醛固定10min;
6、加3%BSA封闭,孵一抗4℃过夜,PBS冲洗3次;
7、孵二抗50min, PBS冲洗3次;
8、滴加一滴抗荧光淬灭封片剂封片,显微镜观察。
备注:组织样本的BRDU染色,可以按照常规的免疫荧光流程进行操作,不需要用盐酸处理。细胞样本的BRDU染色,则需要严格按照以上的步骤进行。
送样运输要求:
1、组织样本放置于20倍样本体积的固定液中固定24h以上,常温运输送样。
2、石蜡切片常温保存运输
3、冰冻切片-20℃保存运输
4、细胞爬片PFA固定15min后用无菌PBS洗涤后用无菌PBS浸泡,4℃冰袋保存运输到实验室。
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