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服务介绍:
DiO是一种亲脂性膜染料,可以标记细胞膜和其他脂溶性生物结构。进入细胞膜后可以侧向扩散,逐渐使整个细胞膜被染色。DiO在进入细胞膜之前荧光非常弱,当与细胞结合后荧光强度会大大增强,被激发后可以发出绿色荧光,并可以用标准的FITC滤光片检测。DiO最大激发波长484nm,最大发射波长501nm。
实验流程:
1、细胞固定并破膜:培养好的细胞爬片倒去培养基,用PBS洗。4%多聚甲醛固定30min,PBS洗3次,每次5min,滴加0.1%TRITON,破膜20min. PBS洗涤2-3次。
2、加dio染料工作液:爬片稍甩干后用组化笔在盖玻片中间细胞分布均匀的位置画圈(防止液体流走),加50-100μ dio染料工作液,37℃孵育5-20分钟,PBS洗3次,每次5 min。
3、DAPI复染细胞核:爬片用PBS(PH7.4)洗涤3次,每次5min。去除PBS后在圈内滴加DAPI染液,避光室温孵育10min。
送样运输要求:
固定好细胞,换成PBS,4℃ 运输到实验室。目前只接受细胞爬片。
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